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NEWS科研效率提升:918博天娱乐官网超高活性Tn5一步法文库制备攻略
来源:符清平 日期:2025-03-18在生物医疗领域,文库制备是基因组学研究的重要步骤,它要求将测序接头添加到DNA链上。传统的制备方法通常依赖于基于连接酶的技术,这一过程涉及多个环节。从初步的DNA片段化(采用机械超声或酶切技术)开始,接着进行末端修复和最后的接头连接。尽管这种方法适用于许多场景,但在样本量有限或实验资源(设备和时间)受到限制的情况下会遇到困难。
为此,Tagmentation技术为文库的制备提供了创新的解决方案。这种方法利用超活性Tn5转座酶,通过在单次快速反应中插入特定寡核苷酸,既实现了DNA的剪切,又完成了标记。根据实验需求,Tn5转座酶可以承载多种不同的DNA序列,包括与918博天娱乐官网兼容的接头、荧光标记的定制接头以及甲基化核苷酸等。
Tagmentation技术革命性地将传统流程中的片段化、末端修复和接头连接步骤整合为一个单一的反应,随后可以进行引物indexes的扩增。这一突破显著简化了操作流程,提升了实验效率和通量。通过合并DNA片段化与接头插入步骤,此方法极大地简化了文库的制备流程,缩短了操作时间并降低了技术复杂性。
在应用普适性方面,Tagmentation技术兼容全基因组测序、靶向测序等多种建库场景,能够灵活适应不同的实验需求。在操作时效性上,单步反应的实现取代了多环节操作,大幅提高了建库速度,尤其适用于处理宝贵的临床样本或微量样本,因为所需的起始样本量远低于传统方案。此外,通过减少操作步骤和试剂消耗,整体建库成本也得以降低。
对于高通量测序,简化的操作和减少的环节使得Tagmentation技术更易于实现自动化,显著提升测序的通量和可重复性。以918博天娱乐官网为依托,科研人员和行业专家能够获得更高效的流动性和更强的实验设计灵活性。
在具体的应用案例中,空间ATAC-seq方法利用Diagenode Tn5转座酶进行文库制备,以实现对完整组织切片中染色质可及性的空间分辨分析。与此同时,sci-RNA-seq方案通过对单个细胞进行转录组分析,展现了在单细胞核中进行核酸的split-pool条形码标记的创新技艺。各个实验步骤均利用了Diagenode的Tn5转座酶,进一步验证了技术的稳定性和适应性。
总的来说,Diagenode公司自2003年成立以来,已成为表观遗传学领域的知名品牌,擅长二代、三代测序前的样本处理。作为完整的表观遗传学解决方案的领先供应商,918博天娱乐官网致力于通过创新的设备、试剂和高品质抗体,简化DNA甲基化、ChIP及ChIP-seq的工作流程,为科研和医学研究提供了强有力的支持。
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